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磷酸盐缓冲液的配制方法

2024/4/11 8:58:47发布63次查看
磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,简称pbs)的是常用于生物学研究的一个缓冲溶液。pbs可以为三种溶液的英文缩写,分别是磷酸盐缓冲溶液(phosphate buffered solution)、磷酸盐缓冲盐水(phosphate buffered saline)及 磷酸盐缓冲钠(phosphate buffered sodium),其配制方法不同,ph值不同,发挥的生物学作用亦不*相同。
磷酸盐缓冲液(pbs)配制方法:
称取8g nacl、0.2g kcl、1.44g na2hpo4和0.24g kh2po4,溶于800ml蒸馏水中,用hcl调节溶液的ph值至7.4,zui后加蒸馏水定容至1l即可。在15lbf/in2(1034×105pa)高压下蒸气灭菌(至少20分钟),保存存于室温或4℃冰箱中。需要注意的是,通常所说的浓度0.01m 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非na 离子或k 离子的浓度,na 离子和k 离子只是用来调节渗透压的。如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100 u/ml*和*之后再调ph、定容、灭菌消毒。
ph 7.6 7.4 7.2 7.0
h2o 1000 1000 1000 1000
nacl 8.5 8.5 8.5 8.5
na2hpo4 2.2 2.2 2.2 2.2
nah2po4 0.1 0.2 0.3 0.4
根据经验来看,新鲜配置的pbs搅匀后其ph值约在7.2-7.4之间,可是在温度的影响下,尤其在夏天,其电离常数发生了改变,在经过昼夜的时间后,ph值会明显改变(我亲自测过偏酸)。所以做实验的同学可要注意了,ph值可能会影响实验结果,甚至可能导致阴性。所以务必记得这个时候和天气,要加强实验条件控制问题。每次使用前用试纸测一下过夜了的pbs,如果发生偏酸或偏碱,注意重新换新液。
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